GSK429286A(RHO-15)：高选择性ROCK1/ROCK2抑制剂的研究进展

化合物概述

GSK429286A（又称RHO-15）是一种具有高度选择性的ROCK1和ROCK2双靶点抑制剂，其IC50值分别为14 nM和63 nM。该化合物相比广泛使用的Y-27632抑制剂展现出更优异的选择性特征，成为研究岩石信号通路的重要工具分子。

体外活性特征

在体外酶活性测试中，GSK429286A表现出显著的抑制效果：

• ROCK1抑制：IC50 = 14 nM
• ROCK2抑制：IC50 = 63 nM
• RSK轻度抑制：IC50 = 780 nM
• p70S6K轻度抑制：IC50 = 1940 nM

在1μM浓度下，该化合物能使ROCK2活性降低超过20倍，而在此条件下仅有MSK1激酶受到显著抑制（活性降低约5倍）。特异性评估结果显示，即使在30μM高剂量下，GSK429286A也不会显著抑制LRRK2（抑制IC50比ROCK2高500倍）。

在功能实验中，该化合物能显著抑制大鼠主动脉环扩张，IC50为190 nM。细胞水平研究表明，10μM的GSK429286A处理可完全消除基底或G14V-Rho突变体诱导的MYPT在HEK-293细胞中Thr850位点的磷酸化作用，其作用效果与H-1152和Y-27632相当。

体内药效学研究

在雄性Sprague-Dawley大鼠模型中，GSK429286A表现出良好的药代动力学特性，口服生物利用度达到61%。在自发性高血压大鼠（SHRs）模型中，单次口服给药3-30 mg/kg可产生剂量依赖性的降压效果。30 mg/kg剂量治疗约2小时后，平均动脉压最大降低达50 mmHg。

信号通路与应用领域

GSK429286A主要作用于以下信号通路：

• Rock信号通路
• 细胞周期/DNA损伤通路
• 干细胞及Wnt通路
• TGF-beta/Smad信号通路

该化合物在癌症研究领域具有重要应用价值，为ROCK信号通路的相关机制研究提供了强有力的工具。

化学特性

化学式：C21H16F4N4O2
分子量：432.37
CAS号：864082-47-3

溶解性：

• DMSO：86 mg/mL (198.9 mM)
• 乙醇：5 mg/mL (11.56 mM)
• 水：不溶

储存条件：自收到货起3年/-20°C（粉状）或1年/-80°C（溶于溶剂）

实验方法推荐

激酶实验：ROCK1激酶试验采用Sf9细胞表达的人重组His标记的ROCK1激酶域进行测定，使用生物素化多肽作为底物，通过闪烁计数定量P33整合情况计算IC50值。

动物实验：使用雄性自发性高血压大鼠模型，通过口服喂食方式给药，剂量约为30 mg/kg。